死體積

死體積是 HPLC 系統(tǒng)從注射點(diǎn)到檢測點(diǎn)之間的體積，不包括色譜柱。
因此，它包括進(jìn)樣體積、進(jìn)樣器體積、色譜柱前后連接管的體積、末端接頭和篩板的體積以及檢測器流通池的體積。
死體積可以通過用零死體積連接器更換色譜柱來測量。
通過注入非常少量的樣品，可以測量從注入時刻到*大峰高之間的時間。
這個時間乘以流速可以很好地估計系統(tǒng)死體積。

駐留體積

駐留體積負(fù)責(zé)梯度的時間延遲。
根據(jù)定義，它是混合室和色譜柱入口之間的梯度 HPLC 系統(tǒng)的體積。
這個體積在等度洗脫下當(dāng)然也存在，但在這種情況下，它對分離沒有影響。
它包括梯度混合器的體積、泵的連接管道、泵頭和止回閥、泵和進(jìn)樣器之間的管道、進(jìn)樣器本身以及進(jìn)樣器和色譜柱入口之間的管道。
啟動梯度時，在梯度通過駐留體積之前，色譜柱不會改變洗脫液成分。
在此期間，色譜柱在等度洗脫下操作。
將梯度方法從一臺儀器轉(zhuǎn)移到另一臺儀器時必須注意。
如果駐留體積不同，即使方法和色譜柱相同，保留時間也可能不同。
駐留體積可以通過運(yùn)行從 100% 甲醇到 100% 甲醇 + 10 mg/L 苯乙酮的階梯梯度來測量。
UV 檢測器將檢測到 S 形跡線。
駐留體積等于進(jìn)樣和檢測器跡線半高之間的時間乘以流速。