HPLC用色譜柱。每一根色譜柱在出廠前，都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，產(chǎn)品保持同一品質(zhì)，用戶可以安心使用。
一、使用前的檢查和須知事項(xiàng)
? 檢查包裝箱的外觀是否完整、有無碰撞損壞痕跡;
? 打開包裝,檢查色譜柱的填料名稱、規(guī)格尺寸、連接型式是否相符;
? 每根色譜柱均附有相應(yīng)出廠檢驗(yàn)報(bào)告，報(bào)告.上記載了序列號、產(chǎn)品編號、填料批號、柱性能、測試色譜條件等內(nèi)容，閱讀后請妥善保管。
二、色譜柱在使用過程中的注意事項(xiàng)
無特殊說明情況下，本公司色譜柱通常保存于下表流動相中。用戶使用前，一定要注意色譜柱評價(jià)流動相與分析樣品實(shí)際使用流動相互溶。
2條件，一定要用某中介流動相(如異丙醇)珞換掉柱內(nèi)的流動相，然后再使用反相流動相; C18固定相采用甲醇/水或乙腈/水為評價(jià)流動相，若要使用含鹽濃度較高的流動相，使用前請用有機(jī)溶劑含量較低的溶劑(如5-15%的甲醇或乙腈水溶液)替換原來的評價(jià)流動相。色譜柱內(nèi)溶劑不互溶或鹽沉淀等現(xiàn)象會對柱性能造成極大傷害，明顯地減少柱壽命。第1次使用，建議先用保存流動相低流速(0.2ml/min) 沖洗1-2個(gè)柱體積，再換用測試流動相，這樣可以保護(hù)柱床，延長柱壽命。
? 色譜柱的安裝
色譜柱在運(yùn)輸過程中或在沒有使用時(shí)，它的兩端總是用堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí)，首先移去兩端的堵頭。請注意將流動相流動的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清理堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時(shí)，建議用戶在接上色譜柱時(shí)一定要遵循柱上標(biāo)記的方向，雙向混用容易導(dǎo)致兩端填料同時(shí)污染，不利于再生和維護(hù)。
? 樣品與流動相
樣品中雜質(zhì)是造成色譜柱污染、柱效下降的主要原因之一，復(fù)雜樣品可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱(SPE柱)對樣品進(jìn)行預(yù)處理，一定要保證樣品不含有微粒雜質(zhì)。若樣品不便處理，要使用保護(hù)柱。有時(shí)樣品溶劑與流動相不匹配(不互溶、極性差異等)會導(dǎo)致色譜峰形變差、出現(xiàn)鬼峰等現(xiàn)象，建議盡可能采用流動相溶解樣品。
流動相所用的各種溶劑至少應(yīng)是分析純，盡可能使用色譜純試劑，流動相用水zui好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。使用前zui好使用溶劑過濾器過濾除去可能存在的微粒。流動相應(yīng)該現(xiàn)用現(xiàn)配，對于含鹽的溶液尤其應(yīng)該注意長時(shí)間放路會產(chǎn)生**或出現(xiàn)沉淀。保證儲存流動相的溶劑瓶清潔。
三、色譜柱的保養(yǎng)
? PH
常規(guī)硅膠基質(zhì)鍵合相填料高效液相色譜柱pH值適用范圍是2.0~7.0，當(dāng)必須在pH值使用范圍邊界條件使用高效液相色譜柱時(shí)，一定要注意每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑徹底清洗路換流動相。
? 壓力
盡管5000 psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?/span>3000 psi。長時(shí)間在高壓下運(yùn)行會損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來源于流速，因此zui大流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言，柱壓會隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。
? 溫度
zui高操作溫度為60C。長時(shí)間在高溫(>75'C) 下操作也會損壞色譜柱，這種情形在高的pH (>8) 條件下特別突出。
? 儲存
1)短時(shí)間或過夜儲存:使用緩沖溶液或含鹽流動相時(shí)，需要用適當(dāng)?shù)娜軇⑸V柱和系統(tǒng)內(nèi)流動相珞換，反相色譜柱儲存溶劑中有機(jī)溶劑濃度zui好不要低于20%。
2)長時(shí)間儲存:存儲之前色譜柱一定要仔細(xì)清洗,避免殘留樣品雜質(zhì)。反相柱可以用純甲醇或乙腈，正相柱可以用純正已烷。為了防止柱床干涸，請用堵頭塞緊色譜柱的兩端。存儲溫度zui好是室溫狀態(tài)。
四、色譜柱的再生
高效液相色譜柱是消耗品，會隨使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加，出現(xiàn)色譜峰高降低，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰，一般來說可能是柱效下降。需要定期進(jìn)行徹底清洗和再生處理。
? 反相色譜柱
取下色譜柱，重新連接到色譜儀上，讓流動相反方向流過色譜柱，流速為通常使用正常流速的一半。依次使用5~10%的甲醇或乙腈、甲醇或乙腈、異丙醇、二氯甲烷、正已烷、二氣甲烷、異丙醇、甲醇或乙腈沖洗色譜柱，每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20個(gè)柱體積，再按正確的流動方向，把色譜柱重新連接到色譜上，重新平衡后檢查性能是否恢復(fù)。注意:由于異丙醇的粘度大，建議注意根據(jù)柱壓力變化作調(diào)整，如將流速降到0.1-0.3ml-min。
? 正相色譜柱
取下色譜柱，重新連接到色譜儀上，讓流動相反方向流過色譜柱，流速為通常使用正常流速的一半。依次使用50:50 (v/v)甲醇:氯仿溶液、乙酸乙酯沖洗色譜柱，再按正確流動方向，把色譜柱重新連接到色譜上，用流動相平衡后檢查性能是否恢復(fù)。
